sábado, 20 de septiembre de 2014

miércoles, 2 de abril de 2014

Medios de cultivo

Agar Tripteina Soya (TSA)
Medio utilizado para propósitos generales, favorece el desarrollo y aislamiento de una gran
variedad de microorganismos aerobios, y anaerobios facultativos y estrictos.
En el medio de cultivo, la tripteína y la peptona de soya aportan nutrientes ricos en péptidos,
aminoácidos libres, bases púricas y pirimídicas, minerales y vitaminas. La peptona de soya
además es fuente de hidratos de carbono que estimulan el crecimiento de diversos
microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente
solidificante.
Al ser suplementado con sangre permite el crecimiento de microorganismos exigentes y la
clara visualización de reacciones de hemólisis.
Puede ser utilizado como base a la cual se suplementa con nutrientes o con antimicrobianos,
lográndose un medio enriquecido o selectivo de acuerdo al aditivo.
Es un medio adecuado para cultivar y mantener cepas de Aeromonas, y aumentando el
porcentaje de cloruro de sodio, para mantener cepas de algunos vibrios (excepto V. cholerae)

Agar Manitol Salado
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciación de
estafilococos a partir de diversas muestras. En el medio de cultivo, el extracto de carne, la
peptona de carne y la tripteína, constituyen la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y
minerales que promueven el desarrollo microbiano. El manitol es el hidrato de carbono
fermentable. El cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentración) es el agente
selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompañante, el rojo fenol es el indicador de pH y
el agar es el agente solidificante.
Se trata de un medio altamente selectivo por la alta concentración salina y diferencial debido a
la capacidad de fermentación del manitol por los microorganismos. Las bacterias que crecen
en un medio con alta concentración de sal y fermentan el manitol, producen ácidos, con lo que
se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. Los
estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol. Los
estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas
rodeadas de una zona del mismo color. Los estafilococos que no fermentan el manitol, se
visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o púrpura.
Este medio de cultivo es recomendado para el aislamiento de estafilococos patogénicos a
partir de muestras clínicas, alimentos, productos farmacéuticos, cosméticos y otros materiales
de importancia sanitaria. Ej: S. Aereus.


Agar Levine EMB
Medio adecuado para la búsqueda y diferenciación de bacilos entéricos, a partir de muestras
clínicas, alimentos y otros materiales.
La fórmula original de este medio de cultivo, fue modificada por Levine, quien eliminó la
sacarosa e incrementó la concentración de lactosa, logrando así una mejor diferenciación de
cepas de Escherichia coli. Es un medio selectivo y diferencial, adecuado para el crecimiento de
enterobacterias.
En el medio de cultivo, la peptona es la fuente nutritiva y la lactosa es el hidrato de carbono
fermentable. La combinación utilizada de eosina y azul de metileno, inhibe el desarrollo de
microorganismos Gram positivos y de bacterias Gram negativas fastidiosas, y también, permite
diferenciar bacterias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa. El agar es el agente
solidificante.
Los microorganismos fermentadores de lactosa, originan colonias de color azulado-negro, con
brillo metálico o mucosas. Las colonias producidas por microorganismos no fermentadores de
lactosa son incoloras. También, pueden crecer especies de Candida y se observan como
colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de
clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias
puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se
observan como colonias de color azul lavanda.
En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.

Agar Base Cetrimida
Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y de otras especies
del género. Su formulación permite el crecimiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y
estimula la formación de pigmentos. Es éste un medio muy semejante al King A, en el cual la
peptona de gelatina aporta los nutrientes para el desarrollo microbiano. El cloruro de
magnesio y el sulfato de potasio promueven la formación de piocianina, pioverdina,
piomelanina y fluoresceína de P. aeruginosa.
La cetrimida es un detergente catiónico que actúa como agente inhibidor, libera el nitrógeno y
el fósforo de las células de casi toda la flora acompañante, aunque inhibe también algunas
especies de Pseudomonas. El agar es el agente solidificante.

Agar Base Sangre
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de numerosos microorganismos. Al ser
suplementado con sangre ovina, permite el crecimiento de microorganismos
nutricionalmente exigentes y la clara visualización de reacciones de hemólisis.
La infusión de músculo de corazón y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, aún de aquellos
nutricionalmente exigentes. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el
agente solidificante.
El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep) promueve el desarrollo de
bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación de las
reacciones de hemólisis.


Agar Citrato Simmons
Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias en base a la capacidad de usar
citrato como única fuente de carbono y energía. En el medio de cultivo, el fosfato
monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de
carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano. Las sales de
fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimático. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico, el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color
azul en medio alcalino y el agar es el agente solidificante.
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar
citrato como única fuente de carbono usan sales de amonio como única fuente de nitrógeno,
con la consiguiente producción de alcalinidad. El metabolismo del citrato se realiza, en
aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico. El
desdoblamiento del citrato genera progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este último, en
presencia de un medio alcalino, da origen a ácidos orgánicos que al ser utilizados como fuente
de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y
esto es indicativo de la producción de citrato permeasa.

Caldo Mc Conkey
Medio de cultivo selectivo, utilizado para la investigación presuntiva de microorganismos
coliformes en aguas, alimentos y otros materiales de importancia sanitaria. En el medio de
cultivo, la peptona es la fuente de aminoácidos y de otros factores de crecimiento, la lactosa es
el hidrato de carbono fermentable, la bilis de buey estimula el crecimiento de las bacterias
coliformes e inhibe a gran parte de la flora gram positiva, y el púrpura de bromocresol es el
indicador de pH. Los coliformes, son microorganismos que fermentan la lactosa, con
producción de ácido y gas. Al acidificar el medio, se produce un viraje del indicador de pH del
color púrpura al amarillo.

Medio de Tioglicolato
Medio de cultivo utilizado en microbiología clínica e industrial para el desarrollo de
microorganismos aerobios y anaerobios y para ensayos de control de esterilidad de diversos
productos. Fue descripto originalmente por Brewer. Presenta la misma calidad nutricional del
Tripteína Soya Caldo y favorece el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos,
incluidos los nutricionalmente exigentes. Las sustancias reductoras como tioglicolato de sodio,
el sulfito de sodio y cisteína disminuyen el potencial de oxido reducción y proporcionan una
anaerobiosis suficiente y debido a los grupos -SH- de estos compuestos, se neutralizan los
efectos bacteriostáticos de los derivados mercuriales, arsenicales y de otros metales pesados
que pudieran estar presentes en la muestra en estudio. El bajo contenido de agar le otorga la
propiedad de ser un medio fluído y retarda la dispersión de CO2 y O2. Debido a todas estas
características desarrollan microorganismos aerobios, anaerobios facultativos y estrictos